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苹果:主要病毒病的田间快速可视化检测方法

www.qlncp.com.cn   发布时间:2020-10-30     来源:农业农村部   

河南农业大学科学家团队采用CRISPR/Cas12a核苷酸检测技术实现苹果主要病毒病的田间快速可视化检测,研究成果于2020年9月4日在《植物生物技术杂志》上在线发表。

研究人员设计linker-ssDNA序列两端与纳米金颗粒交联(DNA1/2-AuNPs),将Cas12a/crRNA系统与DNA1/2-AuNPs等体积混合,当体系中存在病毒靶标序列时,激活Cas12a降解linker-ssDNA,导致DNA1/2-AuNPs呈分散状态从而呈现红色(阳性);当体系中没有病毒靶标序列时,Cas12a蛋白无法被激活,完整的linker-ssDNA可使DNA1/2-AuNPs沉淀聚集,从而褪去红色(阴性)。

该方法可以检测到反应体系中最低25个病毒粒子,步骤简单,流程耗时短,可以快速确认感染病毒的苹果植株或筛选无病毒的苗木。

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